G-Biosciences HOOK 6X His蛋白纯化试剂盒

产品名称：G-Biosciences HOOK 6X His蛋白纯化试剂盒

产品货号：786-630

英文名称：HOOK™ 6X His Protein Purification

产品品牌：G-Biosciences

产品规格：5

产品简介：

HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒允许从细菌培养物中纯化可溶性 6X His 标签蛋白。细菌首先被裂解细菌 PE LB™ 和 PE LB™-溶菌酶释放总可溶性蛋白质，同时保持蛋白质的结构和活性。6X His 标签蛋白通过固定化金属亲和层析 (IMAC) 纯化，使澄清的裂解液通过预装柱。

Bacterial-PELB™ 试剂盒已开发用于从细菌细胞中提取可溶性蛋白质。它是对基于溶菌酶的裂解的专有改进，它允许提取可溶性蛋白质并同时去除细胞裂解过程中释放的核酸（DNA 和 RNA）。Bacterial-PE LB™ 裂解液可消除粘度积聚，从而以较低的离心力实现有效澄清。

HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒可用于 镍 螯合固定化金属亲和层析 (IMAC) 柱或 钴螯合 IMAC 柱。与镍螯合树脂相比，钴螯合树脂对 6X His 标签的结合亲和力较低，这导致非特异性结合较少，并可能导致产量略低。

HOOK™ 6X His 蛋白纯化试剂盒经过优化，可产生 >10mg/250ml 的可溶性 His 标记蛋白培养物，纯度为 80-90%，具体取决于蛋白的表达水平、树脂类型、构象和溶解度特征。

产品特征

从约 250 毫升细菌中分离出 >10 毫克 His 标记的蛋白质

无需超声处理，随附裂解缓冲液和酶

可提供镍或钴树脂

产品组分：

货号           产品名称               规格

Bacterial PE-LB™ 100ml 100ml

PE LB™

-Lysozyme 2 x 1ml 2 x 1ml

Nickel Chelating Columns* 5 

Cobalt Chelating Columns  5

His Binding/Wash Buffer 100ml 100ml

His Elution Buffer 100ml 100ml

产品应用：

用于从细菌中分离 6X His 标记的重组蛋白

产品使用说明;

在使用HOOK™6X His Protein纯化试剂盒之前，推荐对你的蛋白质的表达和溶解度水平进行估计。

正常表达蛋白，用Bacterial PE-LB™试剂裂解，澄清

SDS聚丙烯酰胺凝胶的离心和观察。

•重组蛋白表达的一个固有问题是溶解性。一些

在细菌中表达的蛋白质是不溶的，并定位于包涵体。

提供的细菌PE LB™可以分离包涵体(见附加协议)

这些可以用我们的包络体增溶(IBS)缓冲液或常用变性剂(8M尿素或6M胍)。

由此产生的可溶性蛋白可以用这个试剂盒，但变性剂和缓冲液中可能需要还原剂来维持蛋白质的溶解性。PELB™溶菌酶:PELB™溶菌酶包含40mg/ml溶菌酶(~80kU)添加800U/ml DNase和24U/ml RNase。我们建议使用PELB™溶菌酶，最终浓度0.1-1mg/ml。溶菌酶水平更高不会提高裂解效率，可能有抑制作用。

为了保持重组蛋白的完整性，建议使用蛋白酶抑制剂混合物在整个纯化过程中使用。的使用的净化技术依赖于金属螯合，因此要避免使用EDTA或其他金属螯合剂作为抑制剂的蛋白酶抑制剂混合物。我们推荐RecomProteaseARREST，蛋白酶抑制剂专为从细菌中纯化重组蛋白而设计的鸡尾酒ProteaseARREST，一种通用的蛋白酶抑制剂可选的EDTA。

•在此之前，树脂和缓冲液应达到室温平衡

产品名称：G-Biosciences HOOK 6X His蛋白纯化试剂盒

产品货号：786-630

关于公司：

Geno科技公司的成立旨在简化生命科学研究。我们的主要目标是瞄准蛋白质研究的关键技术，并找到负担得起的方法来简化和改进这些技术。多年来，Geno技术公司已经扩展到其他研究领域，但我们的主要目标仍然是蛋白质，我们的主要目标"简化和改进这些技术"仍然成立。2010年，随着"蛋白质人"的演变，这一信息得到了强化，我们的标志性吉祥物和G-BioSciences品牌，Geno科技公司的注册商标。

G-Biosciences 的团队检查了特定实验技术的方方面面，从蛋白质提取到蛋白质纯化和检测，以确定我们可以瞄准的关键领域进行改进。因此，我们现在制造的一切，从简单的缓冲器在方便的浓度和大小，定制制造的设备，如管O-Dialyzer，增强和简化关键技术。我们重点研究的关键领域包括但不限于蛋白质检测、样品制备、电泳、西印、质谱测量、检测开发、抗体生产和蛋白质纯化。

G-BioScience现在为蛋白质和生命科学研究市场提供了数千种产品，所有这些产品的设计都希望使研究人员的实验室时间更简单、更实惠。