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为确保细胞在冻存过程中保持活力,正确使用DMSO冻存液至关重要。以下是关于如何正确使用DMSO冻存液的指南:
1. 选择合适的细胞:选择对数生长期、生长状态良好的细胞进行冻存。
2. 准备冻存液:配制含10%DMSO(可根据细胞类型调整至5-12%)和适当比例的基础培养基或血清的冻存液。确保冻存液新鲜配置或保存得当。
3. 清洗细胞:用PBS清洗细胞,去除残留的培养基和血清。
4. 收集并悬浮细胞:通过离心收集细胞,并用冻存液轻轻悬浮细胞,确保细胞均匀分布。
5. 分装与标记:将细胞悬液分装至冻存管中,每管1~1.5ml,并标记细胞的名称、日期和操作者。
6. 控制降温速率:将冻存管放入冷冻器中,逐渐降低温度至-80°C或更低,降温速率控制在-1~-2°C/min。在-25°C以下时,可增至-5~-10°C/min。
7. 长期储存:细胞到达-80°C或更低温度后,可移至液氮容器中长期保存。
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