ELISA试剂盒的17个操作技巧

　　ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因为ELISA试剂盒价格低廉且准确性搞、反应时间短等优点，所以适合大批量的检测，一般常常用于食品安全检测方面。

　　ELISA试剂盒17个相关操作技巧如下:

　　1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　　2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。

　　3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

　　4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。

　　5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。

　　6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

　　7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的过氧化物酶标记抗人IgG工作液。

　　8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。

　　9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

　　10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

　　11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

　　12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

　　13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

　　14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。

　　15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。

　　16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。

　　17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。