细胞冻存袋分享细胞冻存方法

　　CryoStore? 袋设计用于低温冷冻血液成分。OriGen 多室冷冻袋有二个型号，CS30M9和CS24M9。每个分室的大冻存容积是6毫升。CS30M9有五个分室，总的大冷冻容积是30毫升。CS24M9有四个分室，总的大冷冻容积是24毫升。这二个型号的多室冷冻袋都可以保存在现有CS50冷冻袋使用的冷冻盒中。

　　细胞冻存袋分享细胞冻存方法，包括以下步骤：

　　(1)将培养的细胞转移至离心管中，在200-500g条件下，离心5-8min，弃掉上清液;

　　(2)将离心后的细胞团先用DPBS重悬，确认细胞团被*打碎，在磁力架上静止2-5分钟，实现细胞跟磁珠的分离;

　　(3)用移液管将细胞悬液转移至新的离心管中，重复去磁珠操作两次;

　　(4)将清除磁珠后的细胞悬液在200-500g条件下，离心5-8min，弃掉上清液，备用;

　　(5)根据需要冻存的细胞总数量，计算冻存介质的体积，将细胞重悬于冻存介质中;

　　(6)将细胞分装于冻存管或者冻存袋中，放置于-80℃超低温冰箱中缓慢冷冻8-18小时，或者放置于程序降温仪中按照相应程序降温至-85℃;降温结束后，将细胞冻存管或者冻存袋转移至液氮中长期保存。

　　回输需要时，在液氮条件下运送至治疗医院，在37℃条件下快速解冻后，可以直接回输给治疗病人。

　　所述步骤5中的冻存介质由氯化钠、二甲基亚砜、葡萄糖、人血白蛋白、低分子葡聚糖和RPMI-1640基础培养基组成，其中氯化钠的质量浓度为0.45-0.9%，二甲基亚砜溶液的体积浓度为5-15%，葡萄糖的质量浓度为5-20%、人血白蛋白的质量浓度为10-50%，低分子葡聚糖的质量浓度为5-20%。

　　优选的，所述步骤5中的冻存介质，其中氯化钠的质量浓度为0.9%，二甲基亚砜溶液的体积浓度为10-15%，葡萄糖的质量浓度为5-10%、人血白蛋白的质量浓度为10-30%，低分子葡聚糖的质量浓度为5-10%。

　　进一步优选的，所述步骤5中的冻存介质，其中氯化钠的质量浓度为0.9%，二甲基亚砜溶液的体积浓度为10%，葡萄糖的质量浓度为5%，人血白蛋白的质量浓度为10%，低分子葡聚糖的质量浓度为5%。

　　所述步骤5中细胞的冻存密度为1×106个/ml-500×106个/ml。

　　以上知识仅供参考，希望对您有所帮助！