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细胞培养基中的浑浊,究竟是什么?

更新时间:2021-08-26

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   细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境。细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。那么细胞培养基中的浑浊,究竟是什么?
  如果排除了污染,细胞培养基中的浑浊通常被解释为金属、蛋白和其他培养基组分的沉淀。沉淀物可能损害细胞健康,因为它们通过螯合可移除养分和其他需要的组分,从而改变培养基的组成。沉淀物也是显微镜可见的,可能会干扰依赖成像的实验分析。
  产生沉淀的可能原因
  一、温度变化
  在细胞培养中,温度是引起沉淀的主要因素之一。当遭遇温度的变化时,高分子量血浆蛋白会从溶液中析出;热失活和冻融循环能促进蛋白降解和沉淀;因为液体或重组成培养基在使用之间保持冷藏储存,盐可能沉淀,尤其是10x或其他浓缩的储存液。
  二、失水诱导的浓度改变
  如果培养基可能蒸发,培养基组分(包括盐) 的浓度将会增加,特别是培养基表面可能容易形成晶体沉淀。
  三、钙盐
  制备无血清培养基时,组分添加的顺序可能导致不可溶分子的形成。钙盐尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反应产生CaSO4晶体。高压灭菌和pH值不稳定会加剧这一问题。
  四、金属补充物
  铜、铁和锌等金属离子是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充物。培养系统中其他血清组分的缺失可能导致这些金属沉淀,为细胞形成有毒的环境。在较高pH环境下(一般>8时),碳酸盐和氢氧根离子与铜离子、磷酸盐和氢氧根离子与铁离子、碳酸盐、磷酸盐和氢氧根离子与锌离子、氢氧根离子与镁离子易形成不溶性沉淀物;在氧化条件下,铜和锌更易于沉淀。
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